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¿Qué clase de vectores pueden emplearse para clonar fragmentos de Dña?
Los vectores de clonación son plásmidos (moléculas de ADN circular extracromosómico y que se replican independiente del DNA nuclear) que llevan insertados fragmentos de ADN, típicamente un gen, que nosotros queremos introducir o expresar en el hospedador.
¿Cómo clonar un fragmento de ADN?
Los pasos básicos son:
- Abrir el plásmido y «pegar» el gen dentro. Este proceso depende de enzimas de restricción (que cortan el ADN) y de ADN ligasa (que une el ADN).
- Insertar el plásmido en las bacterias.
- Cultivar bacterias portadoras de plásmido en gran cantidad y usarlas como «fábricas» para producir la proteína.
¿Qué enzimas utiliza el ADN recombinante?
En 1975 Daniel Nathans y Hamilton O. Smith descubrieron un tipo de proteínas -las enzimas endonucleasas o enzimas de restricción- que actúan como «tijeras moleculares», cortando la doble cadena de ADN a través del esqueleto de fosfatos sin dañar las bases.
¿Qué vectores se usan para transferir genes en ingeniería genética?
Entre los vectores génicos se encuentran:
- Transposón. Retrotransposón. Transposón de ADN.
- Plásmido.
- Vector de clonación. Cósmido. Fagémido. Fásmido.
- Integrón.
- Vector viral. Virus. Virus satélite. Viroide.
¿Qué bacterias se utilizan en ingeniería genética para clonar genes?
Son junto con las bacterias los sistemas más utilizados. El Saccharomyces cerevisiae fue el primer sistema eucariota secuenciado completamente. Otra levadura importante es P. pastoris, utilizada para conseguir proinsulina en cultivo discontinuo y quitinasa en cultivo continuo.
¿Cómo se crean los clones experimentales?
En un experimento convencional de clonado molecular, el ADN que se desea clonar se obtiene del organismo objeto del trabajo, luego se lo trata con enzimas en un tubo de ensayo para producir fragmentos más pequeños de ADN.
¿Qué son los vectores de clonación?
Los vectores de clonación son secuencias de ADN que sirven para transferir nuevas secuencias de ADN a células huésped. A continuación se enlistan algunos vectores de clonación empleados: Plásmido: Molécula de ADN circular que se replica de manera autónoma dentro de una bacteria.
¿Qué es el ADN recombinante?
Se podría definir como el conjunto de metodologías que permiten transferir genes de un organismo a otro y expresarlos (producir proteínas para las cuales estos genes codifican) en organismos diferentes al de origen. El ADN que combina fragmentos de organismos diferentes se llama ADN recombinante.
¿Cómo se clona el ADN de un fago?
BACTERIOFAGO LAMBDA Para clonar ADN utilizando este vector • Se purifica el ADN del fago • Se corta con una enzima de restricción, tanto el ADN del fago como el fragmento ADN de interes. • Se unen con una ADN ligasa.
¿Qué es la clonación de genes?
El propósito de este tema es que conozcas las partes que conforman un vector para que comprendas el proceso de clonación de genes. La clonación de genes consiste en multiplicar un fragmento de ADN recombinante en una célula huésped (comúnmente se emplean bacterias o levaduras) y mantener las células transformadas.